Recidivas associadas à resistência a drogas na hanseníase / Relapse related to drug resistance in leprosy

A poliquimioterapia/Organização Mundial da Saúde foi implantada efetivamente no Brasil em 1991, contribuindo drasticamente para redução da taxa de prevalência e cura da hanseníase. No entanto, a sua comprovada eficácia não tem impedido a ocorrência de recidiva da doença. Falha no tratamento, persistência bacilar ou resistência a drogas são fatores que podem ou não estarem associados a ela. O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de recidiva e associá-la com a presença de cepas resistentes do Mycobacterium leprae entre 28 indivíduos que apresentaram suspeita clínica de recidiva após tratamento por monoterapia sulfônica, esquema da Divisão Nacional de Dermatologia Sanitária ou poliquimioterapia. Biópsias das lesões de pacientes multibacilares, com diagnóstico clínico de recidiva, atendidos por demanda espontânea, foram coletadas para avaliar resistência a drogas por meio da técnica de inoculação em pata de camundongo. Dentre as amostras avaliadas 42,8% apresentaram bacilos sensíveis à dapsona e rifampicina e 10,7% apresentaram resistência à dapsona; não foram isolados bacilos resistentes à rifampicina. A emergência de bacilos resistentes, especialmente à rifampicina, é um alerta para os programas de controle da hanseníase. Monitorar a disseminação destas cepas é importante, pois elas apresentam um sério obstáculo para a eliminação da doença, principalmente em países onde a hanseníase ainda é endêmica.

The multidrugtherapy proposed by the World Health Organization has been effectively implemented in Brazil in 1991. It helped reduce the prevalence and achieve the cure of leprosy. However, its proven efficacy has not prevented the occurrence of relapses in some leprosy patients. Irregular treatment, bacillary persistence or resistance of Mycobacterium leprae to drugs are factors that may be associated with relapse. The objective of this study was assess the occurrence of relapse and associate it with the presence of Mycobacterium leprae resistant strains. In order to do that, 28 individuals who were clinically diagnosed as relapse after treatment with sulphone monotherapy, the National Division of Sanitary Dermatology scheme or multidrugtherapy. Biopsies from lesions of multibacillary patients attended by spontaneous demand were collected to verify resistance to drugs through the mouse foot pad inoculation technique. Among the samples evaluated 42.8% had bacilli susceptible to dapsone and rifampicin and 10.7% showed resistance to dapsone. No rifampicin resistant bacilli were isolated. The emergence of resistant strains, especially to rifampicin, is a threat to leprosy control programs, therefore, monitoring the spread of these strains is important because resistance pose a serious obstacle to the elimination of disease, particularly in countries where the disease is endemic.

Trends in multidrug-resistant tuberculosis: [review]

Multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) is an increasing global problem. The extent and burden of MDR-TB varies significantly from country to country and region to region. Globally, about three per cent of all newly diagnosed patients have MDR-TB and the proportion is higher in patients who had previously received anti-tuberculosis (anti-TB) treatment reflecting the failure of programs designed to ensure complete cure of patients with tuberculosis. The management of MDR-TB is a challenge that should be undertaken by experienced clinicians at centers equipped with reliable laboratory services and implementation of DOTS-Plus strategy.

Extração de DNA de biópsias de pele fixadas em formalina tamponada e embebidas em parafina e amplificação por PCR / DNA extraction from formalin-fixed and paraffin-embedded skin biopsies and PCR amplification

Biópsias de pele oriundas dos serviços de diagnóstico da hanseníase podem ser grande fonte de material para estudos retrospectivos em genética humana e do Mycobacterium leprae. No entanto, os procedimentos de fixação e inclusão em parafina podem dificultar a obtenção de DNA de qualidade para amplificação por PCR. Assim, estas amostras requerem protocolos especiais para a extração do material genético. O objetivo deste trabalho é apresentar um método alternativo para extração de DNA com base na combinação de calor e digestão enzimática. Para tanto, os cortes foram aquecidos a 120º C em solução tampão de pH 9,0, submetidos à digestão enzimática com proteinase K e o DNA foi extraído por meio de solução de fenol:clorofórmio:álcool isoamílico. A amplificação por PCR para as regiões dos genes humanos TNF e LTA foi bem sucedida para 85,4% dos espécimes. Considerando o DNA do M. leprae, obtivemos amplificação em 67,6%, 48,5%, 36,7% e 64,8% para os marcadores TA18, GTA9, TTC e RLEP, respectivamente. Concluímos que este é um método de baixo custo que proporcionou um rendimento satisfatório de DNA de boa qualidade para emprego em PCR a partir de biópsias parafinadas de pele.

Skin biopsies from leprosy diagnostic services can be great sources of material for retrospective studies concerning human and Mycobacterium leprae genetic. However, fixation and paraffin embedding procedures make difficult to obtain good quality DNA to PCR amplification. Thus, paraffin-embedded samples require special protocols to DNA extraction. The aim of this paper is to present an alternative method for DNA extraction based on the combination of heat and enzymatic digestion. The sections were heated at 120ºC at pH 9.0, submitted to enzymatic digestion with proteinase K and the DNA was extracted by using phenol:chlorophorm:isoamilic alcohol. PCR amplification for regions in TNF and LTA human genes was successful for 85.4 % of specimens. Regarding M. lepraeDNA, we obtained amplification in 67.6%, 48.5%, 36.7% and 64.8% for the TA18, GTA9, TTC and RLEP markers, respectively. We conclude that this is an inexpensive method which provided a satisfactory yield of a good quality DNA for PCR from paraffin- embedded skin biopsies.